ПЛР базується на трьох простих кроках, необхідних для будь-якої реакції синтезу ДНК: (1) денатурація матриці на окремі нитки; (2) відпал праймерів до кожного вихідного ланцюга для синтезу нового ланцюга; і (3) подовження нових ланцюгів ДНК з праймерів.
Процес ПЛР складається з 4 етапів:збір, підготовка, ампліфікація та очищення після ПЛР. Етапи ПЛР-машини відбуваються на етапі ампліфікації.
Q-чат
- ПЛР (полімеразна ланцюгова реакція) автоматизований процес реплікації коротких цільових сегментів ДНК у мільйони копій.
- Крок 1: Денатурація. реакційну суміш нагрівають до 95 градусів C, щоб денатурувати ДНК в окремі ланцюги.
- Крок 2: Відпал грунтовки. …
- Крок 3: Нарощування грунтовки. …
- Вимоги до ПЛР. …
- Taq полімераза.
Правильний варіант – С Денатурація, відпал, подовження. Полімеразна ланцюгова реакція або ПЛР складається з наступних трьох етапів: Денатурація – два ланцюги ДНК матричної ДНК відокремлюються один від одного при нагріванні до 92 ℃. Відпал – Праймери відпалюють до 3'-кінця одиночних ланцюгів ДНК.
Полімеразна ланцюгова реакція — це процедура тестування ампліфікації нуклеїнової кислоти, яка складається з денатурація, ренатурація, подовження та ампліфікація короткого сегмента ДНК або РНК.
Криву можна розбити на чотири різні фази: лінійна основна, рання експоненціальна, логарифмічно-лінійна та плато фази. Дані, зібрані з цих фаз, важливі для розрахунку фонового сигналу, порогового значення циклу (Ct) і ефективності підсилення.